产品简介

MEALLCELL 人脐带间充质干细胞培养基是米奥生物自主研发的一款无外源动物成分的人间充质干细胞培养基。针对人脐带来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养，并保持其多向分化潜能。本产品内毒素水平远低于中国药典标准，生产过程遵循ISO9001体系,并符合GMP指导原则。

Meallcell脐带充质干细胞培养基主要成分：氨基酸，维生素、无机盐、白蛋白，转铁蛋白、胰岛素、微量元素，细胞因子等。

产品特性

改变传统的一种培养基养所有干细胞，细分领域，针对脐带间充质干细胞，效果更好

1.无外源动物蛋白成分，大大降低各类病毒、霉菌和支原体等的污染风险。

2.全程无血清生产，极大降低批次间差异。

3.可用于原代分离，且培养过程无需包被培养板。

4.扩增效率高，24h左右增殖翻倍，节省培养时间。

5.内毒素< 0.03EU/ml，远低于中国药典水平。

品名	规格	数量	运输
MeallCell人脐带间充质干细胞无血清培养基Human Umbilical Cord MSC Basal Medium	500ml	1瓶	冰袋
MeallCell人脐带干细胞添加剂Human Umbilical Cord MSC Supplement	25ml	1瓶	干冰

人脐带间充质干细胞细胞复苏(10cm dish) ：

1. 从液氮中取出冻存的脐带MSC细胞，迅速将冻存管放入37℃水浴快速融解

2. 在生物安全柜或超净台中，将解冻后的细胞悬液缓慢加入5 mL预温的人脐带间充质干细胞培养基。

3. 1000rpm 离心3 min，吸掉上清，加入10ml人脐带间充质干细胞培养基重悬细胞。

4. 将细胞均匀铺到培养皿中，水平十字振动培养皿使细胞均匀分布，5% CO2的37℃恒温细胞培养箱中培养24小时后观察细胞状态。

5. 24h后更换新鲜人脐带间充质干细胞培养基继续培养，每2-3天更换培养液。

hMSC细胞传代培养：

1. 在显微镜下观察细胞，当细胞融合度达到90%，即可传代。

2. 在超净台/安全柜中，吸掉原有培养基，加入PBS溶液清洗一次，加入细胞消化液，使之完全覆盖皿/瓶底。

3. 室温孵育4-5分钟或37℃孵育2-4分钟，显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。

4. 加入消化液2倍体积的人间充质干细胞培养基，用移液器轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞，并轻轻吹打混匀，使细胞完全分散。

5. 将细胞悬液转移到15 mL离心管中，1000 rpm离心3 min。

6. 弃上清，加入人脐带间充质干细胞培养基，重悬细胞，计数。1：3-1：4比例传代，或按1-2x104 cells/cm2 传代，均匀铺在培养皿/瓶中，置于37℃，5%CO2 培养箱中培养。注意：细胞传代所需的时间：2-4天。5代及之前的细胞，生长速度较快。5代以后的细胞，生长速度稍缓。

脐带MSC细胞冻存：

1. 细胞达到90%汇合度，吸掉原有培养基，PBS清洗一次。

2. 加入细胞消化液使之完全覆盖皿/瓶底，室温孵育4-5min或37℃孵育2-4min分钟，显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。

3. 加入消化液2倍体积的人间充质干细胞培养基，用移液枪轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞，并轻轻吹打混匀，使细胞完全分散。

4. 将细胞悬液转移到15 mL离心管中，1000 rpm离心3 min，吸掉上清。

5. 加入适量细胞冻存液，调整细胞冻存密度在1×106 cells/mL左右，每支冻存管分装1.5-2ml。

6. 直接放入-80℃，24h后转入液氮中长期保存。